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Seahorse XF 底物氧化压力测试试剂盒

(货号 103672-100、103673-100 和 103674-100) 

一套强大的分析方法,可用于研究活细胞在高能量需求条件下对细胞底物的氧化。这些试 剂盒有助于研究细胞如何通过改变或转变对线粒体底物(例如长链脂肪酸、葡萄糖/丙酮酸 和/或谷氨酰胺)的氧化,从而执行激活、增殖、分化和微环境生存等关键细胞功能,并对遗传或药物干预做出响应。


这些试剂盒结合了广受认可的线粒体功能 XF 分析(细胞线粒体压力测试)和底物通路特异性抑制剂(乙莫克舍、UK5099 和 BPTES),可报告多种功能参数,提供丰富、可靠的数据。试剂盒随附经验证的试剂、标准化方案和简便易用的 Seahorse Analytics,大幅提升用户体验。
  • 产品特点

  • 技术参数

  • 应用领域

  • 订货信息

  • 了解如何通过操控或控制底物氧化活性来控制细胞表型或命运。

  • 利用特定的、经优化的 XF 底物氧化压力测试试剂盒和方案,了解哪些底物与特定细胞功能和/或表型相关或是特定细胞功能和/或表型所必需的。

  • 基于广受认可的 XF 分析(XF 线粒体压力测试)研究线粒体代谢:深入研究特定底物氧化对细胞功能(包括激活、增殖、分化和功能障碍)的影响。

  • 使用相应的底物通路抑制剂,揭示细胞在基础呼吸和高能量需求条件下对三种主要线粒体底物的依赖性:长链脂肪酸、葡萄糖/丙酮酸和/或谷氨酰胺。

  • 可单独或组合使用,允许研究单个底物或同时研究多个底物。

  • 实时提供丰富的多参数信息,而基于底物摄取或底物利用情况的终点分析法无法获得这些信息。

  • 化合物直接溶解于分析培养基,无需 DMSO 或其他有机溶剂。

  • 每批次利用功能分析进行了严格测试和验证,可提供一致、可靠的结果。

  • 将分析结果文件上传到您的安捷伦 Seahorse Analytics 账户,以计算和报告 XF 底物氧化压力测试的参数,与您的合作者共享数据,或导出数据至 Microsoft Excel 或 GraphPad Prism,以满足其他绘图或分析需要


• 基础呼吸:用于满足细胞 ATP 需求的耗氧量和线粒体质子渗漏所致的耗氧量。显示基础条件 下细胞的底物需求 

• 急性响应:由于加入底物氧化抑制剂(Etomoxir、UK5099、BPTES)而引起的耗氧率变化。 报告为 OCR 变化 (即 ΔOCR pmol/min)

• 最大呼吸:加入解偶联剂 FCCP 获得的最大耗氧率。FCCP 通过刺激呼吸链在最大能力下工作 来增加对底物的需求,这会导致底物(糖、脂肪和氨基酸)的快速氧化来应对这一代谢挑战。 显示细胞在最大呼吸条件下的底物需求 

• 非线粒体呼吸:在添加鱼藤酮/抗霉素 A 后,由于一些细胞酶继续消耗氧气而持续产生氧消 耗。这对于准确测量线粒体呼吸非常重要 

• 标准底物氧化压力测试工作流程:3 种互补性分析,每种分析都侧重于使用相关抑制剂 (Etomoxir 或 UK5099 或 BPTES)在优化浓度下测试细胞对单个底物 (LCFAs、 G/P 或 Q) 的需求。在检测液中的葡萄糖、丙酮酸钠和谷氨酰胺底物饱和的条件下进行分析

• Etomoxir:一种长链脂肪酸氧化抑制剂。Etomoxir 抑制肉毒碱棕榈酰基转移酶 1a (CPT1a), 该酶对于长链脂肪酸从细胞质基质转移至线粒体进行 β 氧化至关重要。注意,浓度超过 4 μmol/L (终浓度)会对线粒体呼吸产生严重的脱靶效应 

• UK5099:一种葡萄糖氧化通路抑制剂。 UK5099 抑制线粒体丙酮酸载体蛋白 (MPC),该蛋白 可以将丙酮酸转运到线粒体中。细胞通过糖酵解将葡萄糖转化为丙酮酸。丙酮酸可以转运到 线粒体中,并通过 TCA 循环氧化 

• BPTES:一种谷氨酰胺氧化通路抑制剂。BPTES 是谷氨酰胺酶 (GLS1) 的变构抑制剂。谷氨酰 胺酶将谷氨酰胺转化为谷氨酸,然后谷氨酸转化为 α -酮戊二酸,并通过 TCA 循环氧化。注 意, BPTES 不抑制 GLS2

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